牛磷脂酰乙醇胺结合蛋白4(PEBP4)酶联免疫试剂盒
产品货号：DM-Cat6800
产品规格：48/96T
牛磷脂酰乙醇胺结合蛋白 4（PEBP4）酶联免疫试剂盒是一种用于体外定量检测牛血清、血浆、组织匀浆等生物液体中 PEBP4 浓度的工具。以下是其详细介绍：
检测原理：通常采用双抗体夹心 ELISA 法。试剂盒中的微孔板预先包被有抗牛 PEBP4 抗体，加入待检样品后，样品中的 PEBP4 会与包被抗体结合，形成抗原 - 抗体复合物。然后加入酶标记的抗牛 PEBP4 抗体，它会与已结合的 PEBP4 进一步结合，形成双抗体夹心结构。洗涤去除未结合的物质后，加入酶底物，如四甲基联苯胺（TMB），酶催化底物显色，颜色的深浅与样品中 PEBP4 的含量呈正相关，通过酶标仪测定吸光度值，再根据标准曲线计算出样品中 PEBP4 的含量。
试剂盒组成：以某一试剂盒为例，通常包含 96 孔板（预包被抗牛 PEBP4 抗体）、标准品、标准品稀释液、检测溶液 A（含生物素标记的抗牛 PEBP4 抗体）、检测溶液 A 稀释液、检测溶液 B（含辣根过氧化物酶标记的亲和素）、检测溶液 B 稀释液、TMB 底物、终止液、洗涤液（30×）、96 孔板覆膜、使用说明书等。
样本要求：一般可检测血清、血浆、组织匀浆等生物液体。血清样本需使用不含热原和内毒素的试管，收集血液后，3000 转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离；血浆样本可用 EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000 转离心 30 分钟取上清；组织匀浆样本需先将组织进行匀浆处理，然后离心取上清液。样本收集后若不及时检测，应按一次用量分装，冻存于 - 20℃或 - 80℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
操作步骤：实验前将标准品、试剂及样本恢复至室温，准备好所需的仪器和材料。
加样：分别取不同浓度的标准品和待测样品 100μL 加入相应的微孔中，37℃孵育 1 小时。
甩干孔内液体，每孔加入 100μL 检测溶液 A，37℃孵育 1 小时。
洗板 3 次，每次加满洗涤液，静置 1 分钟，甩去洗涤液，吸水纸上拍干。
每孔加入 100μL 检测溶液 B，37℃孵育 30 分钟。
洗板 5 次，操作同步骤 4。
每孔加入 90μL TMB 底物，37℃避光孵育 10-20 分钟。
每孔加入 50μL 终止液，立即在 450nm 波长处测定各孔的吸光度值。
试剂盒性能：
检测范围：0.312-20ng/mL。
灵敏度：最低检测浓度通常小于 0.117ng/mL。
特异性：该试剂盒对牛 PEBP4 具有高灵敏度和良好的特异性，与其他类似物无明显交叉反应或干扰。
精密度：板内变异系数（CV）＜10%，板间变异系数（CV）＜12%。
储存条件：通常保存在 2-8℃，避光防潮保存，有效期一般为 6 个月。
上海笃玛生物科技有限公司
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