案例概况客户:某武汉高校艾滋病研究领域的重点课题组应用产品:点成CRFT免液氮程序降温仪应用场景:PBMC细胞冻存客户背景PBMC在医学和科研中,可用于免疫研究,疾病诊断和监测,疫苗开发,药物测试等多种重要场景。冷冻保存通常仍然是研究PBMC表达和功能的不可避免的一步,特别是针对罕见疾病,样本稀缺且难以集中获得。冷冻保存对于建立生物库和用新方法研究历史样本至关重要。当这些细胞用于诊断或治疗目的时,保持其功能能力和存活率尤为重要。
该用户团队聚焦人类重大病毒性传染病和恶性肿瘤的临床治疗难题,使用PBMC细胞进行肿瘤及 HIV 感染的免疫治疗研究。该课题组目前的冻存方法是使用的冻存盒放在冰箱中进行降温,但复活率较低,只有30%-40%。为了提高细胞的复活率,该课题组和点成联合进行了一次实际测试。在测试中,我们使用点成CRFT程序降温仪,根据冻存细胞的特性,设置了合适的慢冻曲线,整个冻存过程中,点成DC-CRFT降温曲线与设定温度一致性非常好,意味着DC-CRFT程序降温仪有这出色的温度控制能力。根据设定程序,使用程序降温仪将样品冷冻至-80℃,后转入液氮中保持。冻存后复苏,测试样品的复苏率大幅提升,达到了93%,可以极大地帮助用户节省时间和资源,提高实验效率。
点成DC-CRFT程序降温仪是一种无液氮系统,可以为冷冻和解冻应用提供精确、可靠的温度控制。它是镜子冷冻保存、组织培养、干细胞研究、生物制药、疫苗和细胞疗法等应用的理想选择。在生物领域中,目前大多数用户都在使用液氮降温仪,或者使用程序降温进行细胞冻存,但液氮系统运行成本高,且很难做到精确控制,同时使用液氮还可能出现冻伤或者吸入液氮导致昏迷的风险。而程序降温盒程序固定,操作复杂,且无法准确控制温度,也并非细胞冻存的最佳选择。点成DC-CRFT程序降温仪斯特林发送机降温原理,通过电驱动电机进行降温,运行成本更低,更环保。并且凭借可由用户定义的编程、实时数据记录和稳健的设计,该系统确保了一致和可重复的结果,在最大限度地提高效率的同时减少了样本损失。
细致的降温程序
在细胞冻存过程中,降温速率是一个关键因素,因为它直接影响细胞的存活率和功能。一般推荐的降温速率通常为每分钟1°C到3°C,这样的降温速率可以有效地减少冰晶对细胞的损伤。由于PBMC细胞对温度敏感,参考相关文献,我们确定使用以下降温程序来进行细胞冻存。该程序分为6个阶段,涉及到3种不同的降温速率和不同的稳定时间。DC-CRFT可以根据不同的冻存细胞性质定制不同的冻存程序,降温速率从0.1℃到10℃可以任意调整。针对不同的细胞,都可以为其设定量身打造的冻存程序,使降温程序更精确,也可用于探索最佳冻存程序。
准确的温度控制
在整个降温过程中,由于设备的控制性能不同,有的设备可能在实际降温过程和设定程序出现偏差,导致降温效果不好。点成CRFT程序降温仪在整个降温过程中,表现出优秀的温度控制能力。图中红色曲线为温度设定曲线,蓝色曲线为实际测量到的冻存平台的温度曲线,可以看到,整个降温过程,冻存平台的温度都和设定温度高度吻合,没有出现大的偏差,这意味着CRFT程序降温仪温度控制性能优异。可以准确执行设定程序,没有大的偏差。
适配不同冻存管的顶部模块
点成DC-CRFT程序降温仪可适用于多种应用。不同的用户也会根据细胞性质和场景需求使用不同的冻存容器。此次测试,使用的是1.8ml 冻存管进行细胞冻存。根据冻存管尺寸,我们配备了H06型号的顶部模块,模块与冻存管接触面积更大,温度能更好地传导,确保准确控温。点成CRFT可提供6种顶部模块,可以适配不同型号的冻存管,冻存麦管,微孔板,冻存袋等。支持定制。确保您的任何冻存容器都能适用。
基于点成DC-CRFT程序降温仪的出色的便捷的温度控制程序已经精确的温控性能。冻存后的PBMC细胞复苏率相比之前使用程序降温盒时提升了约125%,即使用冻存盒时PBMC细胞复苏率只有30%~40%,使用DC-CRFT程序降温仪冻存后细胞复苏率达到93%,实验效率得以大幅提升!
点成DC-CRFT的优势l 免液氮无污染
传统液氮程序降温仪冷却样品后的挥发液氮气体可能包含细菌、真菌孢子、病毒和朊病毒等污染源。不使用液氮可最大程度地减少污染的风险。
l 内置程序更便捷
l 温度曲线操作简单
l 运行成本低
约为液氮控制系统的1%,使用24V电源运行。
l 样品可以原位成核/播种
l 可拆卸互换的顶部模块
对PBMC进行研究,除冻存以外,还需要经历血液采集,PBMCs分离以及PBMCs解冻几个流程。点成可以为您提供全面的解决方案帮助您进行高效的工作。
分离过程:在PBMC分离过程中,需要几次进行离心操作,DC-LMC-3000离心机,最大离心加速度可达560g,转速100-3000rpm可调节,适用于PBMC分离过程
优势
l 定时功能:1 ~ 90分钟,自动关机功能
l 适配不同的离心管,更换转子方便快捷,最大可容纳12支离心管或2个微孔板
l 转子的“软启动”和“慢停止”功能
l 多重加减速模式
l 采用特殊定制强力电机,运行安静
l 自动”不平衡性”检测,停止运行并发出警报
点成DC-C系列移液器l 外观精美:人体工学&轻量化设计;柱塞结构平滑,将阻力减至最小,使用方便,可长时间移液
l 性能优越:由 PVDF(聚偏二氟乙烯)制成的耐用尖端锥体抗物理和化学腐蚀能力达到最高,且适用于各种吸头
l 操作方便:可单手轻松推动,避免污染
l 设计贴心:两步柱塞操作,可进行正向和反向移液技术;轴形状设计理想,有助于移液器吸取狭窄处或深管中的溶液
l 识别简易:每个移液器上标记单独的永久序列号,便于追溯;颜色编码,便于识别
活性检测:在冻存前以及解冻后,都需要对样本进行细胞活性检测,使用AO/PI双荧光染色法对PBMC细胞进行染色,然后利用点成DC-LUNA-FL™双荧光细胞计数仪自动计数细胞。
点成DC-LUNA-FL™双荧光细胞计数仪l DC-LUNA-FL™ 具有四种计数模块:明场细胞计数、荧光细胞计数、酵母细胞计数和 GFP 转染分析
l 先进的成像软件和GFP、RFP荧光光学元件灵敏地检测荧光染色细胞。
l 快速高效荧光:30s = 3个图像捕获和分析,明场:10s = 1个图像捕获和分析
解冻:冻存样品从液氮中取出后,需要迅速在37℃水浴环境种进行解冻。
点成JBA系列恒温水浴l 使用场景:室温+5ºC ~ 95ºC
l 独特的Set and Forget™技术,快速加热,精准控温
l 简单直观的控件,可快速轻松地进行温度设定
l 实用的前面板锁定,禁用前面板控件以防止意外更改
l 浴槽底部加热垫和传感器的结合,优化温度均匀性和工作空间
l 各种型号的托盘,促进热对流和最佳的温度均匀性,可以将任何容器直接放在浴槽中
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