
一、结构特性
核心骨架:以线性PEG链为核心,PEG链具有优异的亲水性、柔韧性和生物相容性,在水溶液中呈现舒展的无规线团构象,能有效增加分子的溶解性和空间位阻效应。
活性基团:分子两端的NHS活性酯基团化学性质活泼,在中性或弱碱性环境下(pH 7.0~8.5),可与含有氨基(-NH₂)的化合物快速发生反应,形成稳定的酰胺键,实现PEG链与目标分子的共价偶联。
二、试剂详情
英文名称:NHS-PEG-NHS,N-Hydroxysuccinimide Ester-PEG-N-Hydroxysuccinimide Ester
中文名称:活性酯-聚乙二醇-活性酯,琥珀酰亚胺酯-聚乙二醇-琥珀酰亚胺酯,N-羟基琥珀酰亚胺-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺
CAS:122375-06-8
分子量:0.4k,0.6k,1k,2k,3.4k,5k,10k(可定制)
规格:1g、5g、10g(可按需包装)
纯度:95%+
试剂性状:由分子量决定,液体或者固体
溶解性:溶于部分有机溶液,溶于水。
储存条件:不超-20℃干燥、避光储存
注意事项:不可反复冻融,现配现用!
供应商:西安凯新生物科技
三、试剂结构式:
四、反应机制
1.反应条件:NHS酯基团在温和条件下(pH 7.0~8.5)与伯胺反应,生成稳定的酰胺键。反应温度一般控制在4℃~37℃,低温有助于减缓反应速率,便于精确控制反应进程;适当提高温度可加快反应速度,但过高的温度可能导致生物分子变性或NHS活性酯水解失效。
2.反应比例:反应物的浓度比例至关重要,需根据目标分子的氨基含量和具体应用需求进行优化。一般情况下,NHS-PEG-NHS摩尔过量10至50倍于含胺材料的量,可确保充分缀合。
五、操作要点
试剂准备:将NHS-PEG-NHS从-20℃取出,平衡至室温后开封(避免吸湿),溶解于无水有机溶剂(如DMSO或DMF)中,配制成10~20 mM储备液。注意,NHS酯对水分敏感,需现配现用,避免储存。
样品处理:将目标蛋白质或多肽溶解于不含伯氨基的缓冲液中,浓度建议为1~10 mg/mL。若样品含胺类缓冲液,需先透析或脱盐置换至合适缓冲液。
反应过程:将NHS-PEG-NHS储备液加入生物分子溶液中,摩尔比通常为交联剂:生物分子=10:1至50:1。在室温反应30~60分钟,或4℃反应2小时,轻微搅拌或振荡。
反应终止:加入含伯氨基的淬灭缓冲液终止反应。
产物纯化:通过透析、凝胶过滤色谱或超滤去除未反应的交联剂及副产物。
产物验证:使用SDS-PAGE、质谱或光谱法(如FT-IR)验证交联效率及产物稳定性。
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西安凯新生物科技编辑小华温馨提示:该试剂仅限于科学研究或工业应用等非医疗领域的使用。
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永磁合金(永磁牌号))

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