HA-DBCO-FITC 透明质酸钠-二苯环辛炔-异硫氰酸荧光素,Hyaluronic Acid-DBCO-FITC使用注意事项(透明panel) 99xcs.com

HA-DBCO-FITC 是一种基于透明质酸钠(Hyaluronic Acid, HA)功能化的荧光标记化合物,通过二苯环辛炔(DBCO)与异硫氰酸荧光素(FITC)相结合,实现了透明质酸分子的可视化。通过化学修饰将 HA 与 DBCO 和 FITC 连接,形成 HA-DBCO-FITC 后,可以在生物医学研究中实现高灵敏度的荧光成像、细胞追踪及药物递送等多种应用。

中文名称: 透明质酸钠-二苯环辛炔-异硫氰酸荧光素

英文名称:HA-DBCO-FITC

用途:科研

状态:固体/粉末/溶液

保存:冷藏

供应:西安齐岳生物科技有限公司

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二、化学结构与功能原理

HA-DBCO-FITC 的化学结构主要由三部分组成:

  1. 透明质酸钠(HA)主链:由 D-葡萄糖醛酸和 N-乙酰-D-氨基葡萄糖交替连接而成的线性多糖,分子量可根据实验需求调整。HA 具有丰富的羟基和羧基,可作为化学修饰的活性位点。
  2. 二苯环辛炔(DBCO)连接臂:DBCO 属于一种铜自由点击化学(Copper-free click chemistry)试剂,能够与叠氮化物(azide)特异性反应,形成稳定的三唑环结构。在 HA 修饰中,DBCO 通过活性酯或氨基化学方法与 HA 分子链连接,既保持 HA 的生物学功能,又为后续的荧光标记提供可控的连接位点。
  3. 异硫氰酸荧光素(FITC):FITC 是一种常用的绿色荧光染料,可与氨基反应形成稳定的共价键。通过与 DBCO 的点击化学反应,FITC 被高效地连接到 HA 分子上,从而赋予透明质酸荧光特性,可用于光学成像和定量分析。

三、制备方法

HA-DBCO-FITC 的制备一般分为两步:

  1. HA-DBCO 合成:通过将 DBCO-NHS(N-羟基琥珀酰亚胺酯)与 HA 分子链上的羧基反应,生成 HA-DBCO 中间体。反应通常在温和的缓冲条件下进行,以避免 HA 链降解。
  2. FITC 接枝:将叠氮化物修饰的 FITC(FITC-azide)与 HA-DBCO 通过 SPAAC(strain-promoted azide-alkyne cycloaddition,张力促进叠氮-炔烃环加成)反应生成 HA-DBCO-FITC。该反应无需铜催化剂,减少了对生物体系的毒性,同时反应条件温和、效率高。

制备完成后,通过透析或柱层析可去除未反应的 FITC 及副产物,得到高纯度的 HA-DBCO-FITC。

四、主要性能特点

  1. 高生物相容性:保持 HA 的天然生物功能,低免疫原性,适合体内外实验。
  2. 可控荧光标记:通过调整 FITC 接枝比例,可以获得不同亮度的荧光信号,便于定量分析。
  3. 水溶性良好:HA 主链本身亲水,结合 FITC 后仍可保持良好的水溶性,适合溶液体系使用。
  4. 点击化学高效连接:DBCO-FITC 通过 SPAAC 反应接枝,无需铜催化,反应速度快且专一性高。
  5. 多功能应用潜力:不仅可用于荧光成像,还可以作为药物载体、组织工程材料或细胞标记探针。

五、应用领域

  1. 细胞与组织荧光成像:HA-DBCO-FITC 可用于体外细胞实验,观察 HA 与细胞表面 CD44 受体的结合情况,实现细胞膜、内吞途径及胞内分布的可视化。
  2. 药物递送与纳米载体:通过将 HA-DBCO-FITC 修饰在纳米颗粒或药物载体表面,可以追踪药物在体内分布和释放动力学。
  3. 组织工程与生物材料:在构建支架材料或水凝胶时,HA-DBCO-FITC 可实现对材料的荧光标记,便于体外或体内的动态监测。

六、使用注意事项

  1. 储存条件:HA-DBCO-FITC 应避光、低温(一般 4℃)保存,以保持荧光稳定性。长期存储可冷冻,避免反复冻融。
  2. 使用浓度:根据实验需求选择合适浓度,过高可能引起非特异性结合或细胞毒性。
  3. 溶解方式:建议先溶于去离子水或生理缓冲液,避免使用有机溶剂直接溶解,以保持 HA 链的完整性。
  4. 实验兼容性:在体外实验中,HA-DBCO-FITC 对大多数细胞类型安全,但在体内实验时仍需评估免疫反应和代谢过程。

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